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生化檢測試劑盒
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以下是天正信達人血血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)試劑盒 的標準化實驗操作流程及關鍵注意事項:
BS-0099 人血血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒
一、檢測原理
采用 ?雙抗體夾心法?:
預包被抗人PDGF-A抗體的微孔板捕獲樣本中的PDGF-AB
標記的抗PDGF-B抗體與復合物結合,形成“抗體-抗原-酶標抗體"三明治結構
HRP催化TMB顯色,450nm波長測定OD值,濃度與吸光度正相關
二、試劑盒核心參數
項目? ?規格?
檢測范圍? 31.2-2000pg/mL(部分品牌0.33-50ng/mL)
靈敏度? ≤2pg/mL 或 0.33ng/mL
樣本類型? 血清、血漿(EDTA/肝素抗凝)、細胞培養上清、組織勻漿
板間變異? CV<10%
回收率? 83-108%(血清/血漿/細胞上清)
三、實驗步驟
1. ?樣本預處理?
血清/血漿?:2500rpm離心20分鐘,避免溶血或脂血
組織樣本?:PBS勻漿后1000×g離心10分鐘取上清
保存?:-20℃分裝,避免反復凍融(≤3次)
2. ?標準品配制?
凍干標準品用1mL稀釋液復溶,梯度稀釋至7個濃度(如2000→31.2pg/mL)
3. ?檢測流程?
加樣:標準品/樣本50μL/孔,空白孔加稀釋液
孵育:37℃ 120分鐘→洗滌6次
加酶標抗體:100μL/孔,37℃ 60分鐘→洗滌6次
顯色:TMB 100μL/孔,避光反應15分鐘
終止:2M硫酸100μL/孔,5秒內混勻
讀值:450nm主波長,630nm參比波長
四、關鍵注意事項
質量控制?
每板需設空白孔、標準曲線孔和質控孔
復溶標準品需充分混勻,避免氣泡
操作規范?
洗滌時需扣干殘液,避免交叉污染
加樣避免觸及孔壁,防止非特異吸附
數據解讀?
標準曲線R2應≥0.99,否則需重復實驗
樣本OD值超出標準曲線時需稀釋復測
五、常見問題處理
邊緣效應?:預溫育板條至37℃可消除外周孔顯色差異
顯色異常?:檢查TMB是否避光保存,HRP是否失活
注:不同品牌試劑盒組分可能差異(如預包被板/凍干抗體),需嚴格按說明書操作。
人血血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)試劑盒 天津天正信達供應:RNA逆轉錄試劑盒、逆轉錄試劑盒、PCR試劑盒 、提取試劑盒、色譜進樣瓶、培養基瓶、試劑瓶、胎牛血清、染色液、試劑瓶、QPCR試劑盒、生物試劑、抗體、瓊脂糖、實驗耗材,我司擁有一支覆蓋生物化學、分子生物學、免疫學等專業人員的研發、構建了儀器設備齊全的實驗技術平臺,主要包括AKTA、高壓均質機、全波長酶標儀、高速落地離心機和qPCR儀等大型儀器設備。
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