產品中心
PCR系列
相關文章
小鼠組織直接PCR試劑盒
產品名稱
產品編號
規格
價格(元)
Mouse Tissue Direct PCR Kit (With Dye)
HRF0221
50 T
423.00
HRF0222
200 T
1083.00
產品描述
本試劑盒可直接快速地對小鼠組織(如鼠尾、鼠耳、鼠趾、肌肉等)樣本進行PCR擴增,具有的樣本兼容性。本試劑盒配備了強力的裂解緩沖液,可以快速裂解樣品,釋放基因組DNA。裂解液可以直接加入到PCR反應體系中,無需精提純化,操作方便。此外,本試劑盒對樣品投入量要求低,5 mg小鼠組織或1-5 mm鼠尾即可進行實驗。
本試劑盒提供的2× Mouse Direct PCR Mix為2倍濃度的熱啟動PCR反應液,包含了用于PCR擴增除模板和引物外的所有組分,大大簡化操作過程,降低污染幾率。
該試劑盒可用于轉基因鑒定、小鼠基因分型等。
產品組分
編號
組分
產品編號/規格
HRF0221(50 T)
HRF0222(200 T)
10185-A
Buffer ML
1 mL×5
20 mL×1
10185-B
Buffer MT
0.6 mL
1.25 mL×2
10185-C
2× Mouse Direct PCR Mix
500 μL
1 mL×2
a)Buffer ML 為裂解緩沖液,包含了強力蛋白變性劑,請戴手套操作。
b)Buffer MT 為終止緩沖液,用以終止Buffer ML的裂解功能。
c)2× Mouse Direct PCR Mix:包含熱啟動Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、MgCl2、反應緩沖液、PCR反應增強劑、優化劑、穩定劑和電泳指示染料等。
運輸方法
冰袋運輸。
保存方法
組分A:2-8℃保存,有效期1年。使長時間多次使用,請分裝凍存,避免交叉污染。
組分B/C:-20℃保存,避免反復凍融。有效期1年。
小鼠組織直接PCR試劑盒 操作方法
樣品基因組DNA釋放
1. 剪取5-10 mg動物組織或1-5 mm鼠尾,置于1.5 mL離心管中;
2. 在上述離心管中加入90 μL Buffer ML,輕輕渦旋使得樣品被裂解液浸潤,短暫離心;
3. 在恒溫孵育儀中設置95℃孵育15 min;
4. 加入10 μL Buffer MT,輕彈混勻,終止裂解;
5. 選做步驟:12000 rpm離心2 min;
6. 將上清轉移至新的離心管,4℃或-20℃保存或直接取上清用于后續PCR擴增。
【注】:組織應盡量剪碎,以便裂解反應更順利進行。
【注】:95℃孵育,一般15 min即可滿足多數PCR需求。若需要的DNA量較大或樣品較難裂解,可將時間延長至30 min。組織塊不需裂解,殘余的部分在后續離心步驟中可被除去。
PCR反應鑒定——PCR反應體系
體積(μL)
終濃度
10
1×
Forward Primer (10 μM)
0.5
0.2-0.4 μM
Reverse Primer (10 μM)
裂解產物(DNA模板)
1
-
ddH2O
補足至 20 μL
【注】:各組分使用前應充分混勻。
a)模板使用量:建議按1-10%總體系量取用模板,20 μL體系建議采用1 μL上清液作為模板;
b)引物終濃度:0.2-0.4 μM可以得到較好結果。反應性能較差時,可在0.1-0.5 μM范圍內調整引物濃度;
c)反應體系:推薦使用20 μL,也可根據使用習慣調整體系體積大小;
d)體系配制:配制好PCR反應體系,置于渦旋儀上渦旋混勻,瞬時離心將反應液集于管底。
天津天正信達供應:RNA逆轉錄試劑盒、逆轉錄試劑盒、PCR試劑盒 、提取試劑盒、色譜進樣瓶、培養基瓶、試劑瓶、胎牛血清、染色液、試劑瓶、QPCR試劑盒、生物試劑、抗體、瓊脂糖、實驗耗材,我司擁有一支覆蓋生物化學、分子生物學、免疫學等專業人員的研發、構建了儀器設備齊全的實驗技術平臺,主要包括AKTA、高壓均質機、全波長酶標儀、高速落地離心機和qPCR儀等大型儀器設備。
電話
在線交流
微信號
返回頂部