在實(shí)驗(yàn)室中，選擇合適的PCR板是確保實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵

　　PCR板的選擇會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生重要影響。在實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備過(guò)程中，PCR板雖然常被忽視，但其重要性不亞于試劑和儀器設(shè)備，直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗。在進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)前，請(qǐng)務(wù)必重點(diǎn)關(guān)注以下五個(gè)核心問(wèn)題。

　　購(gòu)買(mǎi)PCR板時(shí)需重點(diǎn)考量以下五大核心因素，確保實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性和效率：

　　一、材料純度與生物兼容性

　　二、熱傳導(dǎo)性能

　　三、光學(xué)特性適配

　　四、結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)與密封性

　　五、規(guī)格匹配與標(biāo)識(shí)系統(tǒng)

　　注：特殊實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景(如機(jī)器人操作)需額外驗(yàn)證邊框強(qiáng)度，推薦聚碳酸酯加強(qiáng)型96孔板。

　　1 選擇合適高度的PCR板

　　當(dāng)您從PCR儀中取出反應(yīng)板時(shí)，是否曾發(fā)現(xiàn)某些孔位未加樣、密封膜出現(xiàn)冷凝水珠，或是孔壁變形導(dǎo)致中部隆起?這些異常現(xiàn)象往往源于使用了與儀器不匹配的PCR板高度規(guī)格。

　　PCR儀或?qū)崟r(shí)熒光定量PCR儀的熱蓋組件含有加熱壓板裝置，當(dāng)熱蓋閉合時(shí)，該裝置會(huì)對(duì)PCR板施加特定壓力。若使用高度過(guò)大的反應(yīng)板，會(huì)導(dǎo)致壓力超標(biāo)，在熱循環(huán)過(guò)程中造成孔壁受壓變形;反之，若在適配高型板的儀器中使用低型板，則會(huì)導(dǎo)致壓力不足，進(jìn)而可能引起樣本冷凝或蒸發(fā)。可調(diào)節(jié)蓋板的儀器適配高、低兩種規(guī)格的板。此類(lèi)儀器的常見(jiàn)識(shí)別特征為配有用于緊固或松開(kāi)蓋板的調(diào)節(jié)旋鈕。部分儀器可自動(dòng)檢測(cè)微孔板高度并自行調(diào)節(jié)，這種設(shè)計(jì)能靈活選用適合實(shí)驗(yàn)應(yīng)用的微孔板。而固定高度蓋板的儀器則必須搭配特定尺寸的微孔板使用。準(zhǔn)確識(shí)別儀器的蓋板與微孔板規(guī)格參數(shù)，可有效避免密封方式不當(dāng)導(dǎo)致的孔板壓裂問(wèn)題。

　　02 選擇合適的裙邊

　　PCR板的裙邊是指板體外圍的框架結(jié)構(gòu)，其主要功能是增強(qiáng)反應(yīng)板剛性，并為自動(dòng)化機(jī)械臂提供平整的抓持面。根據(jù)裙邊設(shè)計(jì)差異，PCR板可分為三種類(lèi)型：

　　無(wú)裙邊

　　半裙邊

　　全裙邊

　　半裙邊

　　• 垂直延伸結(jié)構(gòu)約為孔深的一半

　　• 提供適中的結(jié)構(gòu)支撐

　　全裙邊

　　• 垂直結(jié)構(gòu)延伸至孔板底部

　　• 提供最大機(jī)械穩(wěn)定性

　　• 便于移液監(jiān)控 - 使用者可通過(guò)孔板底部、側(cè)面或頂部直接觀察樣本體積透明孔采用未添加染料的聚丙烯材料制成，因而具有半透明特性。

　　主要優(yōu)勢(shì)：

　　• 直觀識(shí)別加樣失誤 - 可清晰判別漏加孔或孔間體積差異。主要缺陷在于存在熒光信號(hào)穿透風(fēng)險(xiǎn)：

　　• 當(dāng)某孔的熒光信號(hào)滲漏至相鄰孔時(shí)，會(huì)導(dǎo)致鄰孔檢測(cè)結(jié)果假性偏高。

　　• 若高熒光信號(hào)樣本與低靶標(biāo)濃度樣本相鄰時(shí)尤為嚴(yán)重，信號(hào)穿透將人為提升低濃度孔的檢測(cè)值。

　　無(wú)裙邊

　　• 框架僅延伸至孔板邊緣

　　• 不具備垂直延伸結(jié)構(gòu)

　　• 光信號(hào)優(yōu)化機(jī)制：不透明孔壁有效阻隔側(cè)向光散射，顯著提升信噪比白色孔采用添加白色染料的聚丙烯樹(shù)脂制成，形成不透明孔結(jié)構(gòu)。

　　主要優(yōu)勢(shì)：

　　• 實(shí)驗(yàn)敏感性保障：對(duì)低濃度樣本的信號(hào)擴(kuò)增與檢測(cè)具有關(guān)鍵性提升。

　　• 抗干擾性能：消除相鄰孔間熒光穿透風(fēng)險(xiǎn)。主要缺陷

　　• 樣本可視性受限 - 僅能通過(guò)垂直俯視觀察孔內(nèi)樣本存在與否及液量情況。

　　• 需依賴(lài)惰性染料標(biāo)記(提升樣本可視性)。

　　4 是否需要硬框

　　容易扭曲變形的PCR板不僅操作困難——還可能影響PCR反應(yīng)效率。若PCR板無(wú)法平放在熱循環(huán)儀模塊上，各孔位可能與模塊接觸不均，導(dǎo)致樣品受熱不均勻。更嚴(yán)重的是，未能正確就位的PCR板在經(jīng)歷升降溫循環(huán)時(shí)可能發(fā)生扭曲變形，致使管蓋或光學(xué)密封膜移位，造成樣品蒸發(fā)。當(dāng)然，易變形的PCR板也無(wú)法兼容自動(dòng)化機(jī)械臂操作。

　　5 選擇信任的供應(yīng)商

　　為了避免可干擾DNA擴(kuò)增的污染，PCR/qPCR塑料耗材應(yīng)不含核酸酶和DNA的污染。盡管如高壓和輻射等滅菌方法可去除細(xì)菌和DNA酶，但這些方法并不能去除灰塵和DNA殘留。殘留的灰塵客戶(hù)可能會(huì)抑制PCR 而片段化的DNA依然可作為模板從而產(chǎn)生非特異性的擴(kuò)增。

　　天津天正信達(dá)供應(yīng)：RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR試劑盒 、提取試劑盒、色譜進(jìn)樣瓶、培養(yǎng)基瓶、試劑瓶、胎牛血清、染色液、試劑瓶、QPCR試劑盒、生物試劑、抗體、瓊脂糖、實(shí)驗(yàn)耗材，我司擁有一支覆蓋生物化學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)等專(zhuān)業(yè)人員的研發(fā)、構(gòu)建了儀器設(shè)備齊全的實(shí)驗(yàn)技術(shù)平臺(tái)，主要包括AKTA、高壓均質(zhì)機(jī)、全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀、高速落地離心機(jī)和qPCR儀等大型儀器設(shè)備。